Astratto

Questo rapporto fornisce un'analisi tecnica dettagliata del profilo tossicologico e genotossicologico degli oligosaccaridi acidi (PAOS) ​​derivati ​​dalla pectina-, una forma specifica di pectina di agrumi modificata. L'analisi si basa sulla valutazione completa della sicurezza di Garthoff et al. InTossicologia e farmacologia normativa (2010).¹Le principali aree di interesse includono la caratterizzazione fisico-chimica del materiale e il profilo di purezza, nonché un'interpretazione critica del divergente

in vitrocontroin vivodati sulla genotossicità e la delucidazione meccanicistica di un'iperplasia uroteliale specie-specifica osservata in modelli di roditori. I dati stabiliscono collettivamente un solido profilo di sicurezza per questo nuovo ingrediente prebiotico.

Caratterizzazione dei materiali e profilo di purezza

La preparazione PAOS valutata negli studi cruciali sulla sicurezza è stata prodotta da pectina alimentare-mediante uno specifico metodo enzimatico. Il processo utilizza la poli(metossil- -galatturonide) liasi (EC 4.2.2.10) e la poli(1,4-alfa-D-galatturonide) glicanidrolasi (EC 3.2.1.15), entrambi derivati ​​da ceppi non-patogeni e non tossicogeni diAspergillus niger.¹Il prodotto risultante è una miscela di oligomeri lineari dell'acido galatturonico, con specifiche di identità chiave tra cui un contenuto di acido galatturonico di 62 g/100 g, un peso molecolare prevalentemente inferiore a 3800 Da (94 g/100 g) e un grado di metilazione di 50.¹

Per qualsiasi materiale destinato ad applicazioni nutrizionali o di ricerca, il profilo di purezza è di fondamentale importanza. Il lotto di PAOS utilizzato negli studi è stato analizzato approfonditamente per rilevare la presenza di contaminanti e residui. I livelli dimetalli pesanti modificati della pectina di agrumie altri contaminanti sono risultati eccezionalmente bassi, conformi ai principi della legislazione pertinente e della buona pratica agricola.¹Una sintesi di questi risultati è presentata di seguito.

Dati estratti da Garthoff et al., 2010¹

I bassi livelli di microgrammi-per-chilogrammo per i principali metalli pesanti come cadmio, piombo e mercurio sottolineano la natura pulita della materia prima e del processo di produzione.

Un'analisi critica dei dati sulla genotossicità

La valutazione della genotossicità del PAOS ha prodotto risultati che evidenziano l'importanza di considerare il quadro tossicologico completo, in particolare il rapporto train vitroEin vivodati. Il PAOS è risultato definitivamente non mutageno nel test di mutazione inversa batterica (test di Ames) su cinque ceppi, con e senza attivazione metabolica.¹

Tuttavia, ilin vitroi test sulle cellule di mammifero hanno prodotto risultati più complessi. Il test sul linfoma del topo è stato ritenuto "equivoco" a causa di risposte positive a concentrazioni altamente citotossiche che non erano riproducibili e prive di una chiara relazione dose{1}}risposta.¹Allo stesso modo, nel test di aberrazione cromosomica utilizzando cellule CHO, il PAOS è stato inizialmente considerato clastogenico in condizioni di trattamento continuo. Un'indagine di follow-ha rivelato che questo effetto dipendeva fortemente dalla citotossicità e dal solvente utilizzato (DMSO). Quando il PAOS è stato sospeso nel terreno di coltura-un veicolo fisiologicamente più rilevante-è stato osservato un aumento significativo di cellule aberranti solo alla dose raccomandata più alta (

5000 ug/ml) ed era associato ad elevata citotossicità (MI del 34%), portando gli autori a concludere che non era biologicamente rilevante.¹Questi risultati suggeriscono il positivo

in vitroi risultati erano probabilmente artefatti dovuti alla citotossicità, un noto fattore di confondimento in tali test.

Il profilo di sicurezza definitivo in vivo

Da qui provengono i dati fisiologicamente più rilevanti per la valutazione del rischio genotossicoin vivostudi. Nello studio di tossicità orale subcronica condotto sui ratti per 13-settimane è stato integrato un test del micronucleo, un disegno che garantisce un'esposizione prolungata alla sostanza in esame e ai suoi metaboliti. Lo studio, che comprendeva anche unnell'uterofase di esposizione, hanno dimostrato che il PAOS non ha influenzato la salute dei genitori, la fertilità, la riproduzione o le caratteristiche dei cuccioli.¹Ancora più importante, l'analisi delle cellule del midollo osseo femorale dei ratti nel gruppo ad alta-dose (10% PAOS nella dieta, un'assunzione superiore a

7 g/kg di peso corporeo/giorno) non ha rivelato alcun aumento del numero medio di eritrociti policromatici micronucleati rispetto ai controlli.¹Inoltre, il rapporto tra eritrociti policromatici e normocromatici era invariato, indicando assenza di citotossicità per il midollo osseo.¹Questo negativo

in vivoIl risultato fornisce la prova definitiva che PAOS non possiede attività genotossica in condizioni fisiologiche.

Chiarimento meccanicistico di un artefatto-specifico

Lo studio sub-cronico ha rivelato un'iperplasia uroteliale diffusa nei ratti alimentati con PAOS al 10%. Piuttosto che essere un indicatore di tossicità diretta da parte degli oligosaccaridi, si è ipotizzato che questo fosse un effetto secondario. È stato progettato uno studio meccanicistico supplementare per verificare l'ipotesi che l'iperplasia fosse causata dal contemporaneo aumento della concentrazione di sodio urinario e del pH, una condizione nota per indurre questo effetto specifico nei ratti.¹Lo studio includeva un gruppo alimentato con PAOS al 10% più l'agente acidificante

NH4​Cl. I risultati erano inequivocabili: il basso pH urinario nel gruppo NH4​Clha completamente impedito lo sviluppo dell'iperplasia uroteliale.¹Ciò ha confermato il meccanismo e dimostrato che l'effetto non è inerente alla PAOS ma è un artefatto della fisiologia urinaria specie-specifica, che non è considerato rilevante per gli esseri umani.¹

Il rigore dimostrato in questi studi riflette l'impegno scientifico di produttori leader come Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. Essendo un'impresa nazionale ad alta tecnologia-che collabora con università di alto livello-, l'azienda dà priorità non solo alla produzione ma anche a una profonda conoscenza scientifica dei suoi prodotti. L'utilizzo dell'idrolisi enzimatica avanzata in un impianto certificato GMP di grado 100.000-GMP-garantisce la produzione di un prodotto di elevata purezzapectina di agrumi modificataadatto per applicazioni impegnative di ricerca e sviluppo. Per richiedere specifiche tecniche, un certificato di analisi o per discutere di collaborazioni di ricerca, contattare wilson@zjgykp.com.

Conclusione: un-ingrediente ben caratterizzato per la ricerca e lo sviluppo

La pectina di agrumi modificata (PAOS) ​​è un materiale con un profilo di sicurezza favorevole e accuratamente studiato. I dati completi mostrano che non è-mutagenoin vivoe potenziali preoccupazioni dain vitroi test sono stati razionalizzati come artefatti di citotossicità. L'osservazione di iperplasia uroteliale nei ratti è stata spiegata meccanicamente come una risposta specie-specifica alla chimica urinaria alterata e non è rilevante per gli esseri umani. L'elevata purezza del materiale e i livelli estremamente bassi di contaminanti, compresi i metalli pesanti, lo rendono un ingrediente ben-caratterizzato e affidabile per ulteriori ricerche e sviluppi nei campi della nutrizione e della farmacologia.

Opere citate

sicurezza della pectina 1.pdf